从购买回来暂养14天的草鱼中,选取540 尾健康草鱼(初始体重:226.48±0.68 g/尾)随机分入18 个网箱,随机以3个网箱为一个处理,共6个处理。每个网箱为一个重复数。以不同添加量的蝎源性抗菌肽的试验饲粮分别饲喂,蝎源性抗菌肽由深圳市新葡亰8883ent生物技术有限公司提供。
如表1所示,处理1到6的蝎源性抗菌肽添加量分别为0.0、0.6、1.2、1.8、2.4、3.0mg/kg饲粮。
表1:试验设计
蝎源性抗菌肽对生长中期草鱼免疫分子的影响
鱼类肠道免疫分子活力或含量能反映肠道的免疫功能。
蝎源性抗菌肽对生长中期草鱼前肠、中肠和后肠免疫分子活力或含量影响见下表2、3、4。
--- 前 肠 ---
免疫分子LZ活力和IgM含量随着饲粮中蝎源性抗菌肽水平增加而显著上升,当蝎源性抗菌肽水平分别上升至12mg/kg和18mg/kg时达到最大值,之后显著下降(P<0.05)。
C3和C4含量随蝎源性抗菌肽添加水平的增加而增加,当蝎源性抗菌肽水平达到1.8mg/kg时达到最大值, 之后逐渐下降,到达3.0mg/kg时显著下降(P<0.05)。
表2:IsCT对生长中期草鱼嗜水气单胞杆菌感染后前肠道免疫分子的作用
--- 中 肠 ---
免疫分子Lz活力和IgM含量随着饲粮中蝎源性抗菌肽水平增加而显著上升(P<0.05),当蝎源性抗菌肽水平分别上升至18mg/kg时达到最大值,之后显著下降(P<0.05)。
C3和C4含量随蝎源性抗菌肽添加水平的增加而增加,当蝎源性抗菌肽水平达到1.8mg/kg时达到最大值,2.4mg/kg时显著下降(P<0.05)。
表3:IsCT对生长中期草鱼嗜水气单胞杆菌感染后中肠道免疫分子的作用
--- 后 肠 ---
免疫分子LZ活力和IgM含量随着饲粮中蝎源性抗菌肽水平增加而显著上升(P<0.05),当蝎源性抗菌肽水平分别上升至1.2mg/kg和1.8mg/kg时达到最大值,达到24mg/kg时显著下降(P<0.05)。
C3和C4含量随蝎源性抗菌肽添加水平的增加而增加,当蝎源性抗菌肽水平达到1.8mg/kg时达到最大值,之后显著下降(P<0.05)。
表4:IsCT对生长中期草鱼嗜水气单胞杆菌感染后后肠道免疫分子的作用
这些结果表明,适宜水平的蝎源性抗菌肽提高了生长中期草鱼肠道的免疫能力。
蝎源性抗菌肽对生长中期草鱼内源性抗菌肽的影响
鱼类内源抗菌肽具有广谦抗菌能力,在非特异性免疫反应中发挥重要作用。
目前在鱼上已发现的抗菌肽包括Hepcidin和和β-defensin-1等。蝎源性抗菌肽对生长中期草鱼前肠、中肠和后肠内源抗菌defensin、Hepcidin、LEAP-2A、LEAP-2B和 Mucin2的mRNA相对表达量的影响见下表5、6、7。
--- 前 肠 ---
内源抗菌defensin-1、Hepcidin、LEAP-2A、LEAP-2B 和Mucin-2的mRNA相对水平随蝎源性抗菌肽的水平增加而增加,当分别上升至1.2mg/kg、1.8mg/kg、1.8mg/kg和1.8mg/kg时达到最大值,之后逐渐下降达到3.0mg/kg时下降显著(P<0.05)。
表5:IsCT对生长中期草鱼嗜水气单胞杆菌感染后前肠中内源抗菌肽基因表达的作用
--- 中 肠 ---
0.6~2.4mg/kg蝎源抗菌肽添加组的Hepcidin mRNA 水平显著高于未添加组和最高剂量组(P<0.05)。
β-defensin-1、LEAP-2A、LEAP-2B和Mucin-2的mRNA相对表达量随蝎源性抗菌肽的水平增加而增加,当分别上升至1.8mg/kg、1.2mg/kg、1.2mg/kg和1.2mg/kg时达到最大值(P<0.05),之后逐渐下降。
表6:IsCT对生长中期草鱼嗜水气单胞杆菌感染后中肠中内源抗菌肽基因表达的作用
--- 后 肠 ---
0.6~2.4mg/kg蝎源抗菌肽添加组的Hepcidin mRNA水平显著高于未添加组和最高剂量组(P<0.05)。
1.8mg/kg蝎源抗菌肽添加组的β-defensin-1 mRNA水平显著高于未添加组(P<0.05)。
LEAP-2A、LEAP-2B和Mucin-2的mRNA相对表达量随蝎源性抗菌肽的水平增加而增加,当分别上升至1.2 mg/kg时达到最大值(P<0.05),之后逐渐下降。
表7:IsCT对生长中期草鱼嗜水气单胞杆菌感染后后肠中内源抗菌肽基因表达的作用
这些结果表明蝎源性抗菌肽通过增强草鱼肠道的抗菌能力,改善草鱼肠道免疫功能。
- 总 结 -
蝎源性抗菌肽可能通过以下两种方式提高草鱼肠道免疫功能:
1、提高相关免疫分子的活性;
2、提高内源性抗菌肽的表达。
以后,再谈到抗菌肽提高草鱼免疫功能的原理时,以上两点就是最新论证的依据啦!
注:以上内容截取自期刊论文:《蝎源性抗菌肽对生长中期草鱼的生产性能及肠道健康的调控作用》,该论文发表在ScienceDirect数据库《Aquaculture》期刊上。
论文链接:https://www.sciencedirect.com/science/article/abs/pii/S0044848621002477