抗生素长期滥用,造成细菌耐药性增强、畜禽二次感染、畜产品药物残留,研发新型抗菌剂迫在眉睫。抗菌肽抗菌谱广、具有多项免疫功能、无药残、不产生耐药性、与其他抗菌物质联用有协同作用和较强的稳定性,其体外抑菌活性已得到广泛验证,但因其免疫调节作用的研究多限于模型动物,与临床应用尚有差距。本研究旨在探索抗菌肽对猪免疫功能的影响,为其在养猪生产中应用提供依据。
1、材料与方法
1.1 试验时间与地点及试验材料
试验于2008年4月15日至7月20日在广东四会下畜牧场进行。抗菌肽由深圳新葡亰8883ent生物技术有限公司提供,商品名称为“肽轻松”。
1.2 试验动物与试验设计
选择胎次与体重相近、日龄为(28±3)d的长大二元断奶仔猪20头(公母各半),随机分成2组,每组10头。对照组饲喂基础饲粮,抗菌肽组在基础饲粮中添加0.3%抗菌肽。基础饲粮配方及营养水平(见表1)。饲粮为干粉状。两组猪分别饲养于相邻的两个猪栏中。常规饲养和免疫。自由采食、饮水。
1.3 样品收集与测定
(1)采血:分别在4月15日、4月19日、5月12日、5月25日、6月7日、6月22日、7月6日、7月20日早上喂料前,同时对对照组和试验组猪仰卧无菌前腔静脉采血 1 mL/头,制作血液涂片。
(2)细胞记数:用酸性 α-醋酸酯酶(ANAE)染色法染色,置光学显微镜下镜检 ANAE + T 淋巴细胞。胞质内出现红棕色颗粒者记为 tANAE + 细胞(T 淋巴细胞),无红棕色颗粒者为 tANAE - 细胞(B 淋巴细胞)。油镜下记数 200 个淋巴细胞。
1.4 统计方法
采用单因素方差分析,SPSS11.5 软件进行统计,试验结果以平均值±标准差表示。
2、结果与分析
2.1 抗菌肽可以提高猪 T 淋巴细胞的含量
由表2可见,4月19日到7月20日,抗菌肽组T 细胞含量高于对照组(5 月 25 日除外)。其中,4月19日、6月22日、7月6日、7月20日差异显著。
2.2 抗菌肽可稳定猪 T 淋巴细胞的含量
试验全期,抗菌肽组猪T细胞含量在相比对照组提高的基础上基本稳定(图 1);对照组猪T细胞含量较低、不稳定,且随日龄增长有明显下降趋势。
3、讨论
T淋巴细胞是机体免疫系统的重要组成部分,通过直接作用或间接释放细胞因子来杀伤“敌人”,主要负责细胞免疫,其数量的变化直接反映机体的免疫水平。本试验结果与已有的一些报道相一致,如有人将抗菌肽直接饲喂动物发现,抗菌肽能促进生长、提高免疫力,同时具有保健和治疗疫病的功能,本试验中抗菌肽组猪群的生长和健康状况明显好于对照组。
4、 结论
抗菌肽组猪 T 淋巴细胞百分率显著提高,猪群整体健康水平稳定,说明抗菌肽可有效提高猪免疫力。